Guanidin tiocianat 593-84-0 olajša ekstrakcijo nukleotidov in peptidov iz živalskih notranjih organov

Gvanidin tiocianat | 593-84-0 | je močan proteinski denaturant. Je bel kristalinični prah, dražeč in občutljiv na svetlobo. Topen je v etanolu in vodi, s tališčem 118℃. Gvanidin tiocianat se uporablja predvsem za denaturacijo, liza celic in ekstrakcija RNA in DNK. Je običajna kemična komponenta za ekstrakcijo nukleinske kisline.

Patent cn111500664a razkriva metodo za ekstrakcijo nukleotidov in polipeptidov iz živalskih notranjih organov z uporabo gvanidin tiocianata. Nukleotidi so spojine, sestavljene iz purinske baze ali pirimidinske baze, riboze ali deoksiriboze in fosforne kisline, ki se pogosto uporabljajo v medicini, izdelkih za matere in otroke, začimbah in aditivih za živila. Polipeptid je Î ±- spojine, ki jih tvorijo aminokisline, povezane skupaj s peptidnimi vezmi, so vmesni produkti hidrolize beljakovin, ki vključujejo različna polja človeških hormonov, živcev, rast in razmnoževanje celic. Njihov pomen je v uravnavanju fizioloških funkcij različnih sistemov in celic v telesu, aktiviranju ustreznih encimov v telesu, spodbujanju prepustnosti vmesne presnovne membrane ali nadzoru transkripcije DNA ali vplivanju na specifično sintezo beljakovin. Sčasoma povzročijo specifične fiziološke učinke.

Živalski organi so bogati z nukleotidi in peptidi, vendar se trenutno ekstrakcija nukleotidov in peptidov večinoma izvaja ločeno, kar ima za posledico zapravljanje virov in zapletene procese. Gvanidin tiocianat je koristen za ekstrakcijo nukleotidov in peptidov iz živalskih notranjih organov. Posebne metode so naslednje:

Najprej operemo drobovje svežih živali, jih odcedimo, sesekljamo, nato pretlačimo, dodamo deionizirano vodo, da dobimo mešano raztopino, nato mešani raztopini dodamo raztopino gvanidin tiocianata, vibriramo in dobro premešamo ter nato stojimo. Nato ji dodamo nosilec, ki vsebuje silicijev dioksid, ker bo gvanidin tiocianat cepil celice, nukleotidi, sproščeni iz celic, pa se bodo združili s silicijevim nosilcem. Odstranite nosilec, ki vsebuje silicijev dioksid, ga absorbirajte in ločite z eluentom, da dobite prečiščene nukleotide.

Nato se preostali raztopini, iz katere smo vzeli nosilec silicijevega dioksida, dodamo raztopino NaCl, ekstrahiramo mešano raztopino, nato dodamo sestavljeno proteazo, nato izvedemo mikrovalovno encimsko hidrolizo, raztopino encimske hidrolize segrejemo v vodni kopeli , centrifugiramo, odvzamemo supernatant in po liofilizaciji dobimo polipeptid.

Ta metoda uporablja lastnosti, da lahko gvanidin tiocianat uniči celično strukturo in denaturira beljakovine. Ne samo, da lahko zaporedno ekstrahira nukleotide in peptide, ampak ima tudi prednosti enostavne metode in visoke učinkovitosti. Hkrati se izogne ​​tudi problemu reakcije med biokemičnimi reagenti pri dodajanju biokemičnih reagentov za ekstrakcijo.